您的位置:首頁 > PPT課件 > 生物課件PPT > 關于生物材料的檢驗的ppt

關于生物材料的檢驗的ppt下載

素材編號:
410995
素材軟件:
PowerPoint
素材格式:
.ppt
素材上傳:
十年螢火照君眠
上傳時間:
2020-04-18
素材大小:
1 MB
素材類別:
生物課件PPT
網友評分:

素材預覽

關于生物材料的檢驗的ppt

關于生物材料的檢驗的ppt免費下載是由PPT寶藏(www.zhtlsm.cn)會員十年螢火照君眠上傳推薦的生物課件PPT, 更新時間為2020-04-18,素材編號410995。

這是關于生物材料的檢驗的ppt,包括了基本術語,生物材料檢驗的意義,生物材料檢驗指標及選擇,生物材料檢驗結果的判定,生物材料檢驗結果的判定,常見檢驗樣品,生物樣品的預處理等內容,歡迎點擊下載。


生物材料檢測
一、基本術語
    生物材料是生物體的體液(血液)、排泄物(尿液、呼出氣)、毛發和試驗動物臟器組織的總稱。
    生物材料檢驗是研究生物材料中化學物質或其代謝產物或生物化學指標的分析測定方法的科學。
    生物監測是指定期(有計劃)地檢測人體生物材料中化學物質或其代謝產物的含量或由它們所導致的無害生物效應水平,以評價人體接觸化學物質的程度及對健康的影響。
正常值是指正常人(無明顯肝、腎及血液系統疾病,無職業有害因素接觸史)的生物樣品中某種成分的含量或生化指標值。常通過對某地區的正常人抽樣調查所得結果進行統計分析,取95%上限值( 職業接觸只引起升高的時候)或97.5%上下限之間值(過高或過低均有一定的危害的時候)。
生物接觸限值是為保護作業人員健康,對生物材料(尿、血、呼出氣)中污染物或其代謝產物所規定的最高容許濃度,或某些生物效應指標改變所容許的范圍。其值相當于健康工人吸入或接觸最高容許濃度的毒物時,生物材料中被測物的水平。
二、生物材料檢驗的意義
為職業中毒診斷和治療效果觀察提供重要的參考指標,為地方病和營養素缺乏病的診斷防治提供依據,亦為制訂衛生標準、正常值或生物接觸限值提供資料。
三、生物材料檢驗指標及選擇
1.生物材料檢驗指標  生物材料檢驗指標主要有以下三個方面:
(1) 生物材料中化學物質的檢驗:如尿中Pb、Hg、Cd、Cr、Ni、V、Se、As、F、I、五氯酚、殺蟲脒的檢驗,血中Pb、Cr、Se、Zn、Cu、Fe、Ca、Mg的檢驗,呼出氣中苯、甲苯、氯乙烯、三氯乙烯等的檢驗;
(2) 生物材料中化學物質代謝產物的檢驗:化學物質進入機體后,在體內被吸收、代謝產生代謝產物,需要對生物材料中某些代謝產物進行檢驗。如尿中酚、馬尿酸、甲基馬尿酸、硫撐雙乙酸、三氯乙酸的檢驗,血中25-羥維生素D3,1,25-二羥維生素D3的測定等。
(3) 生物效應指標的檢驗:化學物質進入機體后,在體內引起某些生化、生理行為或其他方面的改變。可以選擇適當的效應指標作為接觸有毒物質的檢測指標。如鉛吸收或鉛中毒時,尿中d-氨基乙酰丙酸(d-ALA)↑、紅細胞中游離原卟啉(FEP)↑、血中鋅原卟啉(ZPP)↑;有機磷農藥中毒時,全血膽堿酯酶活性降低。
2.生物材料檢驗指標的選擇原則
以化學物質的代謝動力學和監測目的為基礎,根據其在體內的吸收、分布、代謝和排泄情況選擇指標,要求所選擇的指標有一定的特異性和靈敏度,與接觸劑量有較好的相關關系。
四、生物材料檢驗結果的判定
    目前多采用與正常值或生物接觸限值相比較進行判定。
    由于受地理條件、環境污染情況及不同測定方法結果間差異等因素的影響,同一成分的正常值可因地區、方法的不同而不同。因此,在選用正常值時,應注意所采用的測定方法和地區差異。
    某些成分的含量除受職業接觸的影響外,還與受檢者的年齡、性別、生理狀態、飲食和用藥情況等因素有關,判定結果時應加以注意。
五、生物樣品的收集和保存
生物樣品的采集和保存是整個生物材料檢驗的重要操作步驟,必須注意選擇適當的生物樣品種類和采樣時間,使生物材料檢驗的結果能反映真實情況;采用正確的采樣和保存方法,防止樣品在采樣、運輸及保存過程中變質、受污染,待測成分損失,保證測定結果準確可靠。
1.樣品的種類
生物樣品的種類較多,尿液、血液、呼出氣、胃液、膽汁、汗液、唾液、乳汁、糞便、毛發、指甲、骨以及動物臟器組織等均可作為不同檢驗目的的樣品。
在選擇生物材料的種類時,要求:
(1)  選用的生物材料中被測物的濃度與環境接觸水平、或與健康效應有劑量反應關系;
(2)樣品和待測成分(指標)足夠穩定以便于運輸和保存;
(3)采集生物樣品對人體無損害,能為受檢者所接受。
         目前用得最多的生物材料是尿液,其次是血液和呼出氣。頭發生長非常緩慢,所采集的樣品實際上是不同時期的混合樣,因此,其測定值與接觸劑量的關系無法確定,這就失去了作為生物監測樣品的意義,主要用作代謝極慢金屬的定性檢驗。
2.樣品的采集和保存
(1)采樣時間:在很多情況下,生物材料中待測物的濃度會隨時間的伸延而變化,變化的快慢與物質在體內的代謝過程有關。半衰期短(幾分鐘~幾小時)的待測物在各種組織中的水平變化很快,因此對采用時間有嚴格規定;半衰期長(幾十小時以上)的毒物或代謝產物,它們在各種組織中的濃度反映較長時間的接觸程度,所以對采樣時間的限制就不必太嚴格。
班前:進入工作崗位前1h
班中:開始工作后2h至下班前1h
班末:下班前1h之內
班后:下班后1h之內
(2)采樣環境
采樣時,工人應離開生產崗位,脫去工作服,洗凈手、臉及取樣部位,在清潔、無污染的場所取樣。
(3)采樣用的容器
根據待測成分、樣品種類及保存條件選擇容器。對無機金屬化合物,可選用高壓聚乙烯、聚丙烯、聚四氟乙烯、石英、硬質玻璃等材料制成的容器,在采樣前,將容器用酸液浸泡24h,洗凈晾干;如測定有機化合物,采樣用的容器應選用玻璃或聚乙烯制品,避免使用橡膠和添加有染料的制品。
(4)樣品的保存
采得的樣品應盡快分析測定。在樣品貯存及運輸時,除要防止樣品變質、不引進干擾物質外,還要避免樣品中待測物質的揮發和在容器上吸留損失。樣品的保存方法要與分析方法相配合。尿樣一般在4℃下可保存2周,在-20℃下一般至少可保存2月。所有樣品最好是在冷藏條件下運輸及保存。注意需要冷凍保存的樣品,不宜用玻璃瓶盛裝,以免凍裂。
(5)采樣記錄
采樣后應立即填寫采樣記錄,填寫的項目應包括:樣品的編號,受試者的姓名、性別、年齡、工種、職業史、個人生活習慣飲食、飲酒、吸煙等,采樣時間、地點、環境、方法,采樣人等。同時在樣品瓶是貼上標簽。
六、常見檢驗樣品 (一)尿樣
    多數物質及其代謝產物在尿中的含量與其在血中的濃度有較好的相關,尿中的含量可以較好的反映血液中物質及其代謝產物的濃度,尿樣收集比較方便,因此,常采用尿液進行檢驗。為使收集的尿樣具有代表性,使分析結果能較好地反映實際情況,用尿液作為生物監測樣品時須注意以下幾點:
1.尿樣的收集
(1)某些物質隨尿液排出無規律性,一日間不同時間尿中排出的量波動較大,在實際工作中,可根據測定目的、要求和條件,收集隨機尿樣、晨尿或全天(24小時)尿樣進行分析;
l 隨機尿樣:收取方便,但由于尿中待測物的濃度波動較大,分析結果往往不能反映實際情況;
l 24小時尿樣:收集全天24小時尿液混勻后,取適量進行分析,計算時以24小時排出某成分的總量計,故所得結果不受某些成分排出無規律的影響,也不受飲水和排汗的影響,但收集24小時尿樣較麻煩,在夏天尿樣易腐敗;
l晨尿:收集受檢者早晨起床后的第一次尿樣進行分析,對多數測定能反映實際情況,收集方便,應用最多。
(2)某些有毒有害物質的排泄速度快,當停止接觸后,尿中被檢物質的含量顯著降低,欲了解機體接觸該物質的情況,宜在工作班前、班中、班末或班后分別留取尿樣進行分析。
2.尿樣的保存
    通常將隨機一次尿樣或晨尿收集于清洗干凈的500m1硬質玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶中;24小時尿樣收集于清潔的2L硬質玻璃瓶中。
尿樣的保存應根據測定項目選擇條件,若測定金屬元素如鉛、汞等的尿樣,可在1L尿樣中加入5ml硝酸,以防腐,防止金屬鹽類沉淀、汞揮發及容器壁吸附,收集尿樣后如不能及時分析,應將尿樣貯于冰箱內,并根據需要加入適當試劑以增加待測成分的穩定性。
3.測定結果的校正
尿中待測成分的測定結果一般以mg/L表示,但這種結果表示方法易受排尿量的影響,排尿量又與飲水量和排汗量有關,為了減少飲水量和排汗量的影響,使一次尿樣和24小時尿樣的結果較接近,需對測定結果進行校正。校正方法有比重校正法和肌酐校正法兩種。
    (1)比重校正法:將尿中被測物濃度校正為標準比重(我國規定尿樣的標準比重為1.020))下的濃度,校正公式為:
(2)肌酐校正法
      在一般情況下飲食、飲水量和利尿劑對肌酐的排出率沒有太大影響,健康人一天排尿所排出的肌酐量變化很小,一般在1.8g左右。因此,可用經尿液排出1g肌酐所相應的待測成分的量來表示尿中待測物的濃度或經尿液排出1.8g肌酐所相應的待測成分的量來代表全天尿中待測成分的含量。校正公式為:
(二)、血液 1.血作為生物檢測樣品
    毒物無論從何種途徑進入機體內,都要被吸收入血液,然后分布全身各器官或被解毒代謝、或排出體外,檢測血液中毒物或其代謝產物的濃度可反映機體接觸該毒物的程度,并與體內毒物吸收的量呈正相關。血樣有待測成分的含量較穩定,個體差異小,取樣污染機會少,不受腎功能影響等優點。因此,測定血液中毒物或代謝產物的含量更有意義。但靜脈取血手續煩瑣,受檢者不易接受,在實際工作中,血樣不如尿樣應用普遍。近年來,隨著分析技術的不斷發展,方法靈敏度的提高,減少了血樣的用量,以耳垂取血代替靜脈取血,既易為受檢者所接受,也給采血工作帶來了方便。
2.血樣的采集和采樣注意事項
 血樣可用全血、血漿或血清。
 全血:用注射器或取血管采集血液注入有抗凝劑的試管中,輕輕轉動使血液與抗凝劑充分混勻。
血漿和紅細胞:將血液緩慢注入有抗凝劑的試管中,室溫下放置或離心,分離后的上清液即為血漿,沉淀的紅色部分為紅細胞。
血清:將血液緩慢注入干燥試管中,室溫下放置15~30min,離心,分離后的上清液即為血清。
在采集靜脈血時要避免污染,防止溶血,對采血部位的皮膚應先用水洗凈。采集末梢血時,不得用力擠壓采血部位,要盡量讓其自然流出,并棄去第一滴血,避免因組織液滲出將血液稀釋。
(三)、呼出氣 1.呼出氣作為生物檢測樣品
    揮發性毒物經呼吸道進人機體后,在肺泡氣與肺部血液之間達到血氣兩相平衡,即揮發性物質在肺泡氣相的分壓和在肺末端毛細血管血液中的分壓是相等的。因此,對呼出氣或肺泡氣中揮發性物質進行分析,可反映人體的攝入水平和環境空氣中的水平。
呼出氣作為評價接觸揮發性化學物質的生物監測樣品,其優點是樣品收集方便,可以連續采樣,樣品中干擾物質少,易為受試者所接受。
    呼出氣樣品有混合呼出氣和終末呼出氣兩種。盡力吸氣后用最大力量呼氣至不能再呼氣為止所呼出的全部呼出氣為混合呼出氣;先盡力吸氣,在平和呼氣后,再盡力呼氣至不能呼氣為止的最后一段呼出氣為終末呼出氣。
2.樣品的采集
 (1)采樣袋或注射器直接采樣法,操作簡便,適用于高含量樣品,所采樣品不便保存。
    (2)活性炭吸附管在低溫下吸附采樣法,采樣過程中待測物質被吸附而濃集在活性炭上,適用于較低含量樣品,所采樣品可以保存1周。
3.采集呼出氣時注意事項
    (1)所用的采樣器對被測物的吸附小,在室溫下的密封性好;
    (2)從揮發性物質的呼吸排出曲線可以看出,在停止接觸后,呼出氣中物質的量(肺排泄率)與脫離接觸后的時間呈指數關系,也就是初始肺排泄率很高,隨脫離接觸后時間的延長而迅速下降,因此應在接觸期間或接觸后短期內采樣。
七  生物樣品的預處理
 生物樣品的成分復雜,在分析前需對樣品進行適當的預處理,以除去雜質,濃集待測成分,分離或消除干擾物質。在測定金屬和非金屬成分時,需將樣品經過無機化處理,使其中的有機物完全破壞,待測成分轉變成為某一價態;當待測成分與干擾成分共存時,或待測成分的含量較低時,需通過溶劑萃取、揮發和蒸餾、共沉淀或采取固相萃取等方法將待測成分與干擾物質相分離,達到分離、凈化和濃縮的目的。
(一)、無機化方法
破壞生物樣品中有機物的方法有濕消化法和干灰化法,可根據樣品及待測元素的性質選用。
1.濕消化法
用強氧化性酸和其他氧化劑,結合加熱,使樣品中所有有機物破壞,待測成分變成易溶的鹽類。常用的氧化性酸有硝酸、硫酸和高氯酸,氧化劑有高錳酸鉀和過氧化氫等。
(1)硝酸-高氯酸法:氧化能力強,反應速度快,消化溫度低,揮發損失小。由于硝酸和高氯酸的沸點均較低,過量的酸液容易揮發除去。
(2)硝酸-高氯酸-鹽酸法:本法用于示波極譜法測定尿中鉛鎘等元素的測定。加入鹽酸的目的是與錫生成氯化物蒸發除去,消除錫對極譜測定的干擾。
(3)硝酸-高氯酸-硫酸法:是應用最廣泛的一種有機物破壞方法,適用于除揮發性元素外的金屬毒物測定時,各種生物樣品的處理。加入硫酸后,可適當地提高消化溫度,充分發揮硝酸和高氯酸的氧化作用,防止燒干。
(1)  硫酸-高錳酸鉀法:利用高錳酸鉀-硫酸在低溫下氧化尿中有機物,再用鹽酸羥胺或過氧化氫將過量的高錳酸鉀褪色,此法專用于分析尿汞時樣品的消化。
2.干灰化法
干灰化法操作簡便,加入試劑少,空白值低,特別適用于大批樣品的處理。但干灰化法使用的溫度高,待測成分易揮發損失,同時待測成分被坩堝材料吸留,難于溶出,使回收率降低。為了幫助灰化,降低待測成分的揮發和吸留損失,可加入適當的助灰化劑,如硝酸、硫酸、硝酸鎂和氧化鎂、氫氧化鉀等。
(二)、分離方法 1.  溶劑萃取法
利用待測成分或待測成分與螯合劑形成的螯合物在兩種互不相溶的溶劑中溶解度不同,也即是在兩相問的分配系數不同,通過萃取使待測成分(或螯合物)進入有機相,干擾成分仍留在水相,而達到分離、凈化和濃縮目的。該法所需設備簡單,應用十分廣泛,但該法需使用的有機溶劑易揮發、易燃、有毒,對操作者的健康有一定影響。
2.揮發法和蒸餾法
這是一類利用物質的揮發性來進行分離分析的方法。
(1)擴散法:在塑料擴散小盒盒底外層的一邊加樣品,另一邊加釋放劑,內層加吸收液,然后加蓋,旋轉搖動小盒,使外層液體接觸混勻,置小盒于30℃擴散數小時,取吸收液作分析。此法可用于尿氟的測定。
(2)靜式頂空分析法:將樣品裝入帶密封蓋的小瓶中,立即蓋嚴,將小瓶置加熱器內于60~80℃下保溫一定時間,使瓶中氣液兩相達到平衡,再用注射器抽取瓶中氣體注入氣相色譜儀進行測定。此法比較簡便,干擾少,適合于生物樣品中揮發性有機物的分析。
(3)動式頂空法:取少量樣品放在一個密閉的容器中,適當加熱并向液體中連續吹人氮氣,將易揮發性的成分吹出帶入另一個盛有吸收液的吸收管中,或在冷阱中冷凝下來,然后進行分析。此法對樣品中待測成分的分離較徹底,并有一定的富集作用。
(4)氫化物發生法:在酸性條件下,待測成分被新生態氫(可由鋅粒或硼氫化鈉與酸反應產生)還原生成氣體氫化物,將氫化物用吸收液吸收顯色后分光光度法測定,或直接導入原子化器中原子化進行原子吸收分光光度測定。此法可以去除大量干擾物質,已廣泛用于鍺、錫、鉛、砷、銻、鉍、硒和碲等元素的分離分析。
(1)  蒸餾法:通過加熱蒸餾或水蒸氣蒸餾,使樣品中的揮發性物質隨水蒸氣一起被帶出來,收集一定的餾出液進行分析。
3.固相萃取法(solid phase extraction,SPE)
是一類基于液相色譜分離原理的樣品制備技術。當樣品溶液通過預先填充有吸著劑的小柱時,待測成分被吸著劑截留,經適當的溶劑洗滌除去可能吸附的樣品基體,然后用一種選擇性的溶劑將待測成分洗脫,達到分離、凈化和濃縮的目的。這類方法簡便快速有效,使用有機溶劑少,在痕量分析中得到了廣泛應用。
(1)吸附SPE:此法是根據待測成分和樣品基體在吸附劑上的吸附能力不同進行分離的,常用的固體吸附劑有硅膠、氧化鋁、活性炭、硅鎂吸附劑及聚苯乙烯樹脂。
(2)分配SPE:是根據物質在兩種互不相溶的溶劑間分配系數不同來實現分離。將適當的液體涂漬或鍵合到載體上制成固相材料,目前使用最多的是硅膠鍵合材料,如C18鍵合硅膠、C8鍵合硅膠、氰基丙基鍵合硅膠及氨基鍵合硅膠等。
(3)離子交換SPE:是利用不溶的固體離子交換劑與溶液中帶相同電荷離子間的交換勢不同來進行分離的。
(4)凝膠過濾SPE:凝膠是高分子物質的溶液在一定條件下形成的半固體胨狀物,它具有多孔性的網狀結構。分子大小不同物質的溶液通過凝膠時,大分子物質被排阻,流出速度快,而小分子物質自由擴散于凝膠顆粒的孔穴中,流出速度慢。
(6)螯合SPE:通過反應將螯合劑偶聯到載體上制成螯合離子交換劑,如用巰基乙酸對棉花纖維素的羥基進行多相酯化反應,而將巰基連接在纖維素分子上制成巰基棉,利用巰基與不同離子形成螯合物的穩定性差異,可以用于Se、As、Hg、Sn、Cu、Pb、Cd、Co、Ni等離子的分離和富集。巰基棉的制備簡單、操作方便、富集元素多、富集倍數大、吸附解析性能好、通過控制溶液的酸度或pH,可有很好的選擇性
(6)親和色譜法:將對待測成分特異的抗體偶聯到載體上制成親和材料,當樣品溶液通過親和材料時,待測成分與抗體發生特異性反應被截留,與雜質相分離,然后用適當的溶劑洗脫待測成分。此法的特異性高,凈化和濃縮效果好。
(三)制備分析樣液
1.稀釋:以適當溶液稀釋樣品后直接測定。它主要用于液體樣品,也可用于固體樣品。本法的特點是不需進行化學處理,大大簡化了分析流程,減小了沾污危險,基體干擾嚴重。
      合理的稀釋比取決于樣品中待測元素的含量、測定方法的檢出限以及樣品組成的復雜程度。在靈敏度滿足分析要求的前提下,可選擇較高的稀釋比。
常用的稀釋劑有水、稀酸溶液、含表面活性劑(如曲通 x-100)或有機溶劑(如正丁醇、乙酸乙酯)的水溶液、基體改進劑的水溶液。為了減緩基體效應,多用標準加入法定量。
        例如:血清可用水、1%硝酸、6%正丁醇等稀釋后以FAAS法測定其中的金屬含量;全血多用含曲通 x-100的水溶液稀釋;毛發、骨、指甲等可先用四甲基氫氧化銨溶解,再適當稀釋后測定。
2.提取法:用酸或其他化學試劑直接從樣品中提取待測元素。本法的突出優點是簡便快速,缺點是有時提取不完全。使用本法時應注意:元素提取效率是否滿足分析要求,共存有機物對測定是否有影響。
3.加壓分解:密閉容器中的濕分解方法。其特點有(1)提高了酸利用率;(2)有效防止了易揮發元素的揮發損失;(3)降低了試劑空白和減少了沾污危險;(4)對樣品的粒徑要求不嚴,通常<1mm即可;(5)可能分解不完全;(6)樣品處理量小,通常<0.5g;6)容器密封性有待改進,溫度<150 ℃  。
4.微波分解:用微波爐進行樣品分解。其特點是(1)處理時間短;(2)樣品分解完全;(3)試劑用量少;(4)沾污危險小。
微波是指頻率為300~300000MHz的電磁波。微波在傳送中遇到金屬等導體會發生反射作用,遇到絕緣體則主要發生穿透作用,介電物質 則位于兩者之間,對微波具有吸收、穿透和反射作用。樣品、溶劑(水、酸等)或脂肪是吸收微波的介質。微波穿透容器直接輻射到樣品和溶劑中,使分子極化,高頻輻射又使極化分子快速轉動,產生猛烈的摩擦、碰撞、振動和撕裂,從而使溫度急劇上升,并不斷更新樣品與溶液的接觸界面,劇烈攪拌溶液,加速了樣品的分解破壞
微波溶樣的設備由微波爐、溶樣器皿及通風、排氣防腐等組成。微波爐由磁控管、加熱腔體、可旋轉的負載盤和控制功率、時間等電子元件組成。操作時切忌放入金屬器皿,以免損壞微波爐,也不應在負載很小或空載下使用 微波爐,否則微波反射回磁控管使其發熱而縮短壽命,必要時可在爐內放一個盛有50~100ml水的燒杯吸收過剩的能量。
進行微波溶樣時,應通過實驗優化所需的時間和功率;分解富含有機物的樣品時,可讓易氧化的物質先分解后再用微波爐分解,或用小功率遞增多步加熱的方式分解,以免反應劇烈。
5.酶分解:利用酶使樣品分解。本法特別適于生物樣品,其突出之處是作用條件溫和,因而能有效防止揮發 損失,他還可維持金屬離子的價態,特別適于形態分析。
        例如將胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草蛋白酶的混合物與肉作用,于pH7.8和37 ℃ 下水解蛋白,可分別測定樣品中的Cr(IV)和Cr(III);枯草桿菌蛋白酶可從蛋白質中釋放出與蛋白質結合的化合物而又不完全溶解蛋白質,枯草桿菌蛋白酶可從豬腎中釋放出5mg /kg水平的黃曲霉毒素。
八 檢驗項目示例
根據元素在機體內的含量,可分成宏量元素和微量元素,凡含量為機體總重量1/10000者稱為宏量元素,<1/10000者為微量元素;根據微量元素在機體中的作用,又可分成必需的、治療用和有毒的三類,有關微量元素與人體健康關系的研究已成為一個活躍領域。經常進行檢驗的無機元素有鉛、鎘、汞、錳、砷、氟、碘,其次為釩、鉻、鎳、鋅、硒等。
(—) 尿鉛和血鉛的測定
1.接觸機會:鉛的工業用途很廣,主要用于制造合金、鉛管、鉛箔、鉛板、蓄電池、印刷鑄字、X射線和g射線的防護等;鉛的氧化物多用于生產油漆、顏料、玻璃、陶釉、防銹劑、橡膠硫化促進劑等;四乙基鉛用作汽油防爆劑。接觸鉛及其化合物的機會多,主要有含鉛金屬的冶煉,鉛礦的開采提煉,造船工業的風割電焊,蓄電池鉛網格板、油漆、顏料的制造,印刷鑄字、電纜制造等工業,均可長期接觸鉛及其化合物的粉塵、煙霧或蒸氣。在日常生活中接觸鉛及其化合物的機會亦多,如罐頭食品、化妝品、某些藥物、釉瓷容器等,城市大氣的污染也使接觸鉛的機會增加。
2.毒性、代謝和監測指標
鉛及其無機化合物主要以粉塵、煙、蒸氣形式經呼吸道進人人體,亦可經消化道吸收;四乙基鉛主要以蒸氣形式經呼吸道進入人體,也可經皮膚、粘膜及消化道吸收。
鉛及其無機化合物的毒作用主要是造成神經、造血、消化等系統和腎臟的損害。四乙基鉛在肝內轉變為三乙基鉛,抑制腦中葡萄糖的代謝,導致腦組織缺氧,造成彌漫性腦損傷。
吸收的鉛進入血液后,有95%與紅細胞結合被輸送到人體的各部位。一部分蓄積在肝、腦、腎、肌肉及血液中。體內的鉛約有75%~80%隨尿排出,約15%經糞便排出。
尿鉛可以反映鉛從體內排出情況,能間接反映機體吸收鉛的量。但由于尿鉛排出受許多因素的影響,有時體內雖有大量鉛蓄積,尿鉛排出量并不高,經驅鉛試驗才明顯增高,因此尿鉛是鉛中毒的輔助診斷指標。血鉛能直接反映近期機體吸收鉛的量,與空氣鉛濃度密切相關,被認為是目前最好的鉛接觸監測指標。
鉛對許多酶系統有不利的影響,造成體內物質代謝改變,如接觸鉛后,尿中d-氨基乙酰丙酸(d-ALA)、紅細胞中游離原卟啉(FEP)和血中鋅原卟啉(ZPP)會增多,測定它們的含量,均有助于鉛吸收和鉛中毒的診斷。
3.檢驗方法
生物材料中鉛的測定方法較多,主要有雙硫腙比色法、原子吸收光譜法、示波極譜法等,也有用陽極溶出伏安法和電位溶出法。
雙硫腙比色法是測定尿鉛的經典分析方法,該法靈敏度較低,干擾較多,操作復雜費時,而且使用的氰化鉀、三氯甲烷等試劑毒性較大,對人體健康有影響。但該法試劑易得,不需要特殊儀器設備,目前仍為基層單位廣泛采用。
原子吸收光譜法包括萃取-火焰原子吸收光譜法、氫化物發生-原子吸收光譜法和石墨爐原子吸收光譜法。使用萃取-火焰原子吸收光譜法時,樣品經過消化后,鉛離子與吡咯烷二硫代氨基甲酸銨(APDC)形成配合物,再用甲基異丁酮(MIBK)進行萃取,取有機相測定;氫化物發生-原子吸收光譜法通過生成氫化物將鉛與樣品機體分離,用電熱石英管原子化,該法的靈敏度高,操作簡便快速,干擾少;石墨爐原子吸收光譜法的最大優點是靈敏度高,血樣、尿樣不需消化,經適當稀釋或加入基體改進劑后即可測定。
示波極譜法靈敏度較高,采用國產示波極譜儀,價格便宜,易于普及。
4.雙硫腙比色法測定尿鉛
(1).原理:用硝酸-高氯酸破壞尿中有機物,使鉛轉變為離子狀態,然后在pH8.5~11.0的條件下,讓鉛離子與雙硫腙反應生成紅色螯合物,萃取后根據顏色深淺比色定量。
(2)雙硫腙的溶解性:
    溶劑             溶解度(g/L)     溶液顏色
    水                  5x10-6
    堿性水溶液      >20                 橙黃
    乙醇                0.3                    藍綠
    四氯化碳        0.64                  綠色
    三氯甲烷        17.8                 藍綠
雙硫腙易溶于三氯甲烷等有機溶劑,難溶于水;在堿性條件下雙硫腙生成鹽而易溶于水,難溶于有機溶劑。利用此性質,可進行萃取液中過量雙硫腙的洗除。
(3)雙硫腙易受鹵素、高價金屬離子(如Fe3+)、過氧化氫等氧化劑氧化,生成黃色的二苯硫代偕二腙,干擾測定,反應式為:
日光、高溫會加速此氧化過程,所以雙硫腙應避光貯存在陰涼處。
雙硫腙的氧化產物不能與金屬離子配位,也失去了酸性,不能與堿作用生成鹽,即不溶于堿性水溶液,易溶于有機溶劑,而雙硫腙能溶于堿性水,根據此性質可進行雙硫腙的提純。
為了防止消化尿樣殘渣中高價金屬離子及其他氧化性物質氧化雙硫腙,應先在消化液中加入鹽酸羥胺等還原劑使這些物質還原。
(4)雙硫腙是一種廣泛的配位劑,除能與鉛配位外.還能與20余種金屬離子配位。
在測定鉛時,應設法避免其它金屬離子的干擾,提高方法的選擇性。常采用的方法是:
①加入掩蔽劑:加入氰化鉀與Cu2+、Ag+、Au+、Zn2+、Cd2+、Hg2+、Fe2+、Co2+、Ni2+等離子生成配位化合物,作掩蔽劑,降低干擾;加入檸檬酸銨與Ca2+、Mg2+、A13+等離子作用,防止其在堿性條件下生成沉淀吸附Pb2+;
注意:在加入氰化鉀前,應先將溶液調為堿性,以免氰化鉀在酸性條件下放出劇毒的氰化氫氣體。
②控制溶液pH:利用金屬離子在不同pH下萃取率的差異來分離除去干擾離子。
如Ag+、Hg2+、Sn2+、Bi3+等離子與雙硫腙的配位能力強,在pH<4的條件下也能配位完全,并被三氯甲烷萃取,此時Pb2+不被萃取仍然留在水相。可以通過在酸性條件下預萃取的方法除去干擾,亦可以先在弱堿性溶液中將Pb2+與干擾離子一起萃取入三氯甲烷中,然后用稀硝酸反萃取Pb2+,此時Ag+、Hg2+、Sn2+、Bi3+等離子仍留在有機相而達到分離的目的。
③改變離子的價態:低價的T1+和Sn2+離子在弱堿性條件下能與雙硫腙配位、但經消化后、T1+和Sn2+被氧化成Tl3+和Sn4+。高價的Tl3+和Sn4+離子在弱堿性條件下不與雙硫腙配位而避免了干擾。
(2)比色方法:用雙硫腙比色法測定鉛時,可用混色法、單色法和回返法。 ①混色法:Pb2+與雙硫腙配位后,用三氯甲烷萃取,則Pb2+-雙硫腙配合物和部分雙硫腙被同時萃取入有機相,利用雙硫腙鉛配合物在510nm波長處有最大吸收,而雙硫腙本身在此波長下有最小吸收,可直接在510nm處測定雙硫腙鉛的吸光度。
此法較簡便,但各管間雙硫腙濃度差異大時會造成比色誤差。
②單色法:利用雙硫腙能溶于稀堿的特性,用10g/L氰化鉀溶液或稀氨水將萃取入三氯甲烷中的雙硫腙洗去,使混色中的藍綠色成分除去,而保留雙硫腙鉛的紅色,目視比色或在510nm波長處測定吸光度。
單色法的靈敏度較高,加入雙硫腙的量不需嚴格控制。
③回返法:雙硫腙的三氯甲烷溶液在620nm波長處有最大吸收,而在此波長下雙硫腙鉛配合物幾乎無吸收。可先在620nm測定萃取液中雙硫腙的吸光度,然后加無機酸將Pb2+離子反萃取入水相,再在620nm處測定加入無機酸使雙硫腙鉛配合物解離釋放出的雙硫腙和原有雙硫腙的總吸光度,增加的吸光度系釋放出的雙硫腙產生,與尿樣中鉛的含量成正比。
5.說明
(1)尿樣的采集時間不限,但采樣時必須避免來自現場環境、工作服及接觸部位等的鉛塵污染;
(2)雙硫腙的純度如不夠,應進行提純,方法是:取O.05g雙硫腙,溶于三氯甲烷中,如有不溶物應過濾,將溶液轉入分液漏斗中,用100m1稀氨水溶液(1%)分4次提取雙硫腙,合并氨提取液于另一個分液漏斗中,用稀鹽酸酸化至有雙硫腙沉淀析出,用三氯甲烷萃取2~3次,每次20m1,此時雙硫腙進入三氯甲烷層;
用蒸餾水洗滌三氯甲烷萃取液2次,棄去洗滌液;加三氯甲烷至100m1,使成為約0.5g/L的雙硫腙三氯甲烷液,放棕色瓶中,貯于冰箱內。
亦可將雙硫腙配制成0.5g兒的三氯甲烷貯備液。臨用前,取一定體積的雙硫腙貯備液與等體積的1%氨水于具塞棕色瓶中振搖,靜置分層后,取上層溶液使用。
(3)三氯甲烷應不合氧化物,檢查方法是;取三氯甲烷10m1加新鮮煮沸的水25m1,振搖3min,靜置分層后取水溶液10ml,加100g/L碘化鉀溶液和5g/L淀粉溶液各數滴,振搖后應不顯藍色。
(4)測鉛所用試劑,如鹽酸羥胺、檸檬酸銨等,應不含干擾金屬離子,否則應預先提純。方法是:取試劑20g,加50ml水溶解,加酚紅指示劑2滴,用(1+1)氨水調節pH至8.5~9.0(指示劑由黃色變為紅色),用雙硫腙三氯甲烷溶液提取,至三氯甲烷層綠色不變為止,再用三氯甲烷洗滌2次,棄去三氯甲烷層,水層加水稀釋至100ml。
氫化物發生-原子吸收光譜法   
1.原理:尿液經硝酸-高氯酸-硫酸消化破壞有機物后,鉛以二價離子形式存在。在一定濃度的硫酸和鐵氰化鉀介質中,以硼氫化鉀作還原劑,將鉛還原成鉛化氫,被氮氣流帶入電熱石英管中原子化,于283.3nm波長處進行原子吸收光譜測定,以標準曲線法定量。
2.測定方法
(1)樣品處理:吸取10ml混勻尿樣于錐形瓶中,加入2.5m1硝酸-高氯酸+硫酸(9+9+2)混合消化液,在電熱板上加熱消化至透明或白色殘渣,繼續加熱至高氯酸分解完全,瓶內出現三氧化硫白煙,取下放冷。用20ml水溶解三角瓶內容物,并定量轉入25ml比色管中,加2.5m1100g/L鐵氰化鉀溶液,加水稀釋至刻度,混勻備用。
(2)測定:預熱儀器,吸取2.0ml樣品溶液或標準溶液于反應瓶中,加30g/L硼氫化鉀溶液,測定吸光度。
3.說明
(1)鐵氰化鉀的作用是提高測定靈敏度,消除干擾:在酸性條件下,直接用硼氫化鉀還原,鉛化合物產生鉛化氫的效率很低,即測得鉛的吸收信號極小。加入鐵氰化鉀,鉛的吸收顯著提高,鐵氰化鉀的濃度為2~50g/L時,鉛的吸收信號最大且不隨鐵氰化鉀濃度的改變而改變,故測定液中鐵氰化鉀的濃度選用10g/L。除鐵氰化鉀外,重鉻酸鉀、過氧化氫、過硫酸銨等也可用來增強鉛的吸收信號,但靈敏度和抗干擾能力不如鐵氰化鉀;
(2)酸度的影響:鉛化氫的發生受酸度的影響較大,酸度過大過小,鉛的吸收信號均降低。只有當硫酸的濃度為0.8%~1.1%時,鉛的吸收信號最大且受酸度改變的影響小。為了得到最高靈敏度和可靠的結果,采用硝酸-高氯酸-硫酸消化尿樣,并要求在消化完時,將過量的硝酸、高氯酸除去,使消化液定容后的酸度恰為發生鉛化氫的最佳酸度;
(3)硼氫化鉀濃度的影響:硼氫化鉀濃度較低時,隨著其濃度的增加,鉛的吸收信號增大,當硼氫化鉀的濃度為30~50g/L時,鉛的吸收信號最大且恒定,故采用30g/L硼氫化鉀溶液。
(4)方法靈敏度、檢出限和線性范圍:在分析條件下。1%吸收靈敏度為0.13ng/ml(0.26ng)、檢出限為0.22ng/ml(0.44ng),標準曲線在0~25ng Pb2+/ml。
石墨爐原子吸收光譜法測定尿鉛
1.原理:尿樣經基體改進劑稀釋后,直接注入石墨管中,用無火焰原于吸收分光光度計測定吸光度,與鉛工作曲線比較定量。
2.測定方法
(1)基體改進劑:稱取4g磷酸二氫銨和6g抗壞血酸,加水溶解并稀釋至1000ml,混勻。
(2)石墨管的處理:在普通石墨管中加入20m110g/L鉬溶液,在氣體流速為100ml/min下,于45~70℃干燥50s,450℃灰化30s,l950℃原子化7s。重復此操作10次,處理后石墨管內壁底部呈灰白。
(3)工作曲線:取不同體積的鉛標準溶液(0.2mg Pb2+/ml,以基體改進劑稀釋),加基體改進劑至0.20ml,各加正常人混合尿液0.20m1,混勻。
(4)測定:取0.20m1混勻尿樣,加入0.20ml基體改進劑,混勻。取10ml注入石墨管中,按下列儀器工作條件,測定吸光度。
波長      283.3nm       干燥    45~75℃     40s
    狹縫      l.3nm         灰化    450℃       30s
    燈電流    7.5mA         原子化  1950℃      7s
                            清除    2050℃      3s
    載氣(氬)  150ml/min,原子化時停氣
    背景校正  塞曼效應或氘燈
3.說明
(1)用石墨爐原子吸收光譜法測得尿鉛的最大優點是只需將尿液稀釋便可直接測定,但尿液組成成分復雜且變化大,不能忽略基體效應的影響,常采用以下三種方法解決:①用標準加入法定量;②用基體改進劑和石墨爐平臺技術,以工作曲線法定量;③用基體改進劑消除基體干擾,石墨管涂鉬降低背景吸收,以工作曲線法定量。
(2)基體改進劑的作用:磷酸二氫銨可以提高灰化溫度,防止鉛的揮發損失,使基體組分在原于化前揮發,從而提高測定靈敏度;抗壞血酸能有效地降低背景吸收。
(3)背景吸收的減免:將石墨管作涂鉬處理,可以有效地降低背景吸收,如用普通石墨管測定尿鉛時,使用30次背景吸收值即達到0.5Au。經涂鉬處理后,開始的背景吸收值約為0.05A,使用100次約為O.3A,150次后,背景吸收仍在0.6A以下。
(4)于標準系列溶液中加入正常人尿液,繪制工作曲線進行定量,既可使標準與樣品的基體組成接近,得到與標準加入法相同的結果,又不會使工作量增加。
示波極譜法測定尿鉛
1.原理:尿液經硝酸-高氯酸-鹽酸消化后,Pb2+離子在底液中產生靈敏的吸附催化極譜波,根據峰電流與溶液中Pb2+離子含量成正比,用工作曲線法定量。
2.測定方法
(1)樣品處理:取混勻尿液25m1于錐形瓶中,加7ml硝酸-高氯酸(5+2),2ml鹽酸,置電熱板上消化至瓶口無白煙,殘渣為白色。
(2)工作曲線:取不同體積鉛標準溶液于錐形瓶中,各加25ml模擬尿,同樣品處理進行操作。
(3)測定:用5.0ml底液溶解樣品或標準消化殘渣,倒入電解池中,在示波極譜儀上,采用三電極系統。測定鉛的峰電流(峰高),鉛的峰電位在-0.5V(對飽和甘汞電極)左右。以標準的峰高對相應的濃度作圖繪制工作曲線,用樣品的峰高從工作曲線查出鉛含量。
3.說明
(1)尿液的消化,應掌握消化至白色殘渣,瓶口無白煙,消化溫度不要太高。如有酸液殘存,會出現畸形峰;如溫度太高,蒸得過干,鉛會有損失,造成結果偏低。
(2)底液及各成分的作用
底液:稱取5.0g碘化銨,7.5g檸檬酸,1.Og抗壞血酸,用水溶解,加入25m1鹽酸,用水稀釋至500m1,混勾。
碘化銨(或鉀):碘離子能與Pb2+離子配位,形成PbI42-配離子,在酸性條件下吸附于滴汞電極表面,產生靈敏的吸附催化極譜峰電流,提高鉛的測定靈敏度;
抗壞血酸:為還原劑,可避免碘離子在酸性條件下被氧化,失去與Pb2+離子的配位作用,延長底液的保存時間,有效地消除氧和其他氧化劑的干擾;
檸檬酸(也可用酒石酸):與干擾離子配位,起掩蔽作用;
鹽酸:保持底液有一定的酸度,是鉛吸附催化波出現的必要條件。
(3)模擬尿:稱取11.6g氯化鈉,2.0g磷酸氫二銨,溶于適量水中,加1ml硫酸,用水稀釋至1L,混勻。
加入模擬尿的作用標準與樣品的基體組成匹配。
  尿鎘和血鎘的測定 一、概述
1.性質:鎘為銀白色,略帶淡藍色光澤的金屬,質軟并富有延展性。原子量為112.4,比重8.65,熔點320.9℃,沸點767℃。鎘不溶于水,可與硫酸、鹽酸、硝酸作用生成相應的鎘鹽,對堿和鹽溶液有良好的抗腐蝕性,鎘在空氣中加熱時能燃燒并生成氧化鎘。鎘的化學性質和鋅相似,鎘離子易與氨、氰化物、氯離子、碘離子等形成配離子,也易與雙硫腙、吡咯烷二硫代氨基甲酸銨等配位。
2.接觸機會
一般人群通過食物、水、空氣和吸煙接觸鎘;職業接觸鎘的機會主要有:鉛鋅礦的開采、冶煉,鎘的生產:鎘化合物在工農業生產中的應用,如鎘作金屬涂層用于電纜工業,鎘顏料的生產和使用、鎳鎘蓄電池或礦燈的制造等。
3.毒性、代謝和監測指標
職業接觸鎘主要是吸入鎘的蒸氣或粉塵,被人體吸收后經血液轉移,大部分濃集于腎臟和肝臟。急性鎘中毒的靶器官是肺,主要臨床現為呼吸道刺激、呼吸困難、肺水腫及急性肺心病等,亦伴有嘔吐、腹瀉等。慢性中毒的靶器官是肺和腎,臨床表現除呼吸道刺激、肺水腫、食欲不振、惡心等外,尚可見腎功能障礙、骨軟化、全身骨痛,這即是痛痛病的主要癥狀。
鎘接觸者的血鎘和尿鎘含量明顯升高,可作為生物監測的常用指標。血鎘可以反映近幾個月接觸鎘的情況,近期接觸鎘量較多,血鎘升高;當接觸情況穩定時,血鎘可反映在工作環境中的接觸情況,是近期接觸鎘和急性中毒診斷的指標。尿鎘是估計體內鎘負荷和慢性鎘中毒的生物監測指標。
美國官方工業衛生家協會(ACGIH)規定接觸鎘時,血鎘的生物接觸限值為10mg/L,尿鎘為10mg/g肌酐。
4.檢驗方法
生物樣品中鎘的測定方法主要有原子吸收光譜法和電化學分析方法。常規火焰原子吸收光譜法的靈敏度較低,且受樣品中鹽及能與鎘形成難解離絡合物的其它金屬離子的干擾,常需要采用絡合萃取法使樣品中的鎘濃縮并與基體成分分離后測定。近年來,采用巰基棉選擇性吸附和解吸鎘,達到消除干擾和富集的目的。石墨爐原子吸收光譜法測定鎘的靈敏度高,但由于鎘的沸點低,不能采用較高的灰化溫度使大部分樣品基體預先除掉,會有較高的背景吸收干擾。
近年采用的解決辦法是:加酸除去血樣中的蛋白質,取上清夜分析;尿樣加基體改進劑,提高鎘的熱穩定性;使用最佳的灰化條件合較低的原子化溫度(使鎘信號與基體信號分開);使用高效能的背景校正器;采用基體匹配標準和標準加入曲線等。
電化學分析方法中,示波極譜法、陽極溶出伏安法、電位溶出法等方法均具有較高的靈敏度,儀器價格低廉,但后兩種方法要求操作條件嚴格,重現性較差。
二、巰基棉分離-火焰原子吸收光譜法測定尿鎘
1.原理:在弱酸性條件下,尿中鎘被巰基棉吸附富集后,用稀鹽酸解吸,于228.8nm波長下,用空氣-乙炔火焰原子吸收光譜法測定鎘的濃度。
2.尿樣的采集和保存
用聚乙烯瓶收集尿樣,測定比重,按尿樣總體積加入1%的鹽酸,于4℃下可保存兩個月。
3.測定方法
取100m1酸化后的尿樣,加入到活塞下裝有0.1g巰基棉的分液漏斗中,用1mol/L氫氧化鈉溶液和1mol/L鹽酸調pH至5.0~6.0,以小于6ml/min的速度過濾。加5ml水洗滌巰基棉,待水濾盡后,加入10m10.2mol/L鹽酸解吸,速度與富集時相同。收集解吸液于10m1容量瓶中,混勻,測定。
    波長  228.8nm  乙炔流量0.9L/min
    狹縫   0.4nm   空氣流量5.5L/min
    燈電流  2mA
4.說明
(1)巰基棉是棉花纖維素的羥基在酸性介質中與硫代乙醇酸發生多相酯化反應的產物,制備方法是:取100m1硫代乙醇酸、70m1乙酸酐、32ml乙酸、0.3m1硫酸混合,加入30g優質脫脂棉,浸泡,密閉后于40℃保溫3天。取出,用耐酸抽濾漏斗抽慮,蒸餾水沖洗至中性,置35℃烘干。于棕色瓶中保存。
(2)尿液的酸度對巰基棉的富集和解吸效率有明顯的影響,最佳的吸附pH為5.0~6.0;解吸時,0.l~0.2mol/L鹽酸可使99.8%的鎘解吸下來。
  尿汞的測定 一、概述
1.性質:汞(Hg)是一種銀白色的液體金屬,原子量為200.6。比重13.6,熔點-33.9℃,沸點357.2℃。汞能溶解除鐵和鉑外的許多金屬生成汞齊。汞不溶于水、硫酸、鹽酸及有機溶劑,易溶于硝酸和王水,能溶于類脂質。汞鹽大部分能溶于水,如硝酸汞、硫酸汞、氯化汞等,但氧化汞、氯化低汞、硫化汞等幾乎不溶于水。
汞易揮發,溫度越高,揮發性越強,0℃時汞在空氣中蒸發達到飽和濃度2.18mg/m3,已是衛生標準0.01mg/m3的209倍多,20℃時,則可達衛生標準的1300余倍。汞的揮發除與溫度和氣壓有關外,還與室內空氣交換的速度以及汞的暴露面積有關。因此,在使用汞時,必須注意不要將汞暴露于空氣中,在汞的表面加水封,可有效地防止汞的揮發。濺灑到桌面或地面的汞應用吸管吸起來。金屬汞及其無機化合物在環境中受微生物的甲基化作用,可以轉變成毒性更大的甲基汞。
2.接觸機會
人們接觸汞的機會較多,如汞礦的開采、冶煉;用汞齊法提煉貴金屬;金屬汞廣泛用于電器器材和測量儀表的制造;化工、輕工等工業使用汞的化合物。
工業三廢如處理不好,可污染大氣、水源、土壤和食物,增加人們接觸汞的機會。
3.毒性、代謝和監測指標
汞及其化合物是有強烈毒性的化學物質,世界上已有多起汞中毒事件發生,如日本的水俁病。
汞及其化合物可以通過呼吸道、消化道或皮膚等途徑進入體內。在生產環境中主要是經呼吸道吸入金屬汞蒸氣、汞化合物的氣溶膠或粉塵。汞蒸氣經呼吸道進入機體后,可通過肺泡壁的毛細血管吸收75%~85%。溶解度高的汞鹽可經消化道迅速吸收。被吸收的汞在細胞內氧化成二價汞離子,汞離子與蛋白質的巰基結合,抑制一系列合巰基酶的活性,引起機體功能障礙。主要損傷神經系統和腎臟,職業性慢性汞中毒的主要臨床表現為口腔炎、易興奮性和汞中毒震顫。
汞接觸者尿汞含量明顯升高,因此尿汞含量可以作為監測汞接觸的常用指標。
4.檢驗方法
  尿汞的測定方法常用雙硫腙比色法和冷原子吸收光譜法,雙硫腙比色法的靈敏度低,影響因素多;冷原子吸收光譜法的靈敏度高,特異性好,操作簡便,是目前尿汞測定最常用的方法。
尿汞的冷原子吸收光譜測定法
冷原子吸收光譜法是用氯化亞錫作還原劑將尿樣中的汞還原成元素態汞蒸氣,被載氣流帶入吸收管道,汞蒸氣吸收253.7nm紫外線,且吸收的程度與汞含量成正比,用標準曲線法或比較法測定尿汞含量。
根據所加氯化亞錫的酸堿性不同,可分為酸性氯化亞錫還原法和堿性氯化亞錫還原法兩種。
(一)堿性氯化亞錫還原法
1.原理:在強堿性(pH=l4)和有鎘離子存在的條件下,用高濃度氯化亞錫將尿中的有機汞和元機汞還原成元素態汞。用測汞儀在253.7nm處測定汞含量。
2.尿樣的采集和保存
用聚乙烯瓶收集一次尿樣,盡快測定比重,加入氫氧化鈉,使其濃度達40g/L,于4℃冰箱中可保存兩周,在分析前將尿樣徹底搖勻。
3.測定方法
(1)樣品處理:吸取10ml(或5ml尿樣+5ml水)于10m1具塞試管中,加入2ml 500g/L氫氧化鈉溶液,0.5m1 10g/L DL-半胱氨酸溶液,混勻。
(2)標準系列:取0、O.10、0.20、0.30、0.40和0.50ml O.5mg/ml的汞標準溶液分別置于6支10ml具塞試管中,加基體尿液至10m1,各加2m1 500g/L氫氧化鈉溶液,O.5ml l0g/L DL-半胱氨酸溶液,混勻。
(3)測定:將配制好的標準溶液或樣品溶液依次倒入汞蒸氣發生瓶中,加1滴磷酸三丁酯,1m1氯化亞錫-硫酸鎘試劑,立即蓋緊發生瓶蓋,接通抽氣氣路,讀取最大吸光度值。以標準管的吸光度對汞濃度作圖繪制標準曲線,由樣品管的吸光度從標準曲線上查得樣品管的汞含量。
4.說明
(1)尿樣中的汞在保存過程中,會因容器吸附或揮發等原因而損失,特別是烷基汞會因細菌或酶的作用而分解。每升尿樣加40g氫氧化鈉,或加20g氫氧化鈉和1g半胱氨酸(穩定劑,防止汞吸附或揮發損失),在4℃或室溫下可保存兩周。
(2)尿中大量的有機物質與反應時形成的氫氧化物產生共沉淀,使反應溶液變稠,影響汞蒸氣的釋放速度。為抵銷這種影響,用比重為1.015±O.002的正常人尿液作基體尿液來配制標準系列。
(3)本法測定結果準確與否,關鍵在于還原劑中氯化亞錫和鎘離子的濃度,只有當反應液中氯化亞錫達到25~50g/L,硫酸鎘達到4~8g/L時,有機汞的還原效率才能與無機汞基本相同。鎘離子作為還原反應的催化劑,是必不可少的,如果不加硫酸鎘,總汞的測定值偏低。
(4)溫度對冷原子吸收光譜法測定汞有明顯的影響,被測溶液的溫度從15℃升高至40℃時。測定值可增加一倍。所以,樣品與標準必須在同一溫度下測定。
(二)酸性氯化亞錫還原法
1.原理:酸性氯化亞錫還原法是先用高錳酸鉀和硫酸破壞尿中有機物,使尿中汞轉變為離子狀態的汞,然后用氯化亞錫溶液將汞離子還原成元素態汞。在253.7nm波長下,用測汞儀測定汞含量。
2.尿樣的采集和保存
用聚乙烯瓶收集一次尿樣,盡快測定比重,于4℃冰箱中可保存1周。
3.測定方法
(1)樣品處理:將尿樣搖勻,吸取2.5m1于大型氣泡吸收管中,加入2m1 50g/L高錳酸鉀溶液,再加入1m1硫酸,放置5min,混勻。于45~50℃水浴或恒溫箱中保溫2h,取出。在振搖下滴加200g/L鹽酸羥胺溶液至褪色,敞口放置20min。連接至測汞儀上,用滴管迅速加入1m1 200g/L酸性氯化亞錫溶液,立即連接抽氣氣路,讀取最大吸光度。
(2)將汞標準溶液作同樣處理和測定,繪制標準曲線。
4.說明
(1)處理樣品時,先加高錳酸鉀溶液,后加硫酸,以避免加硫酸后尿樣發熱,導致汞揮發損失。在有高錳酸鉀存在時,即使將溶液加熱到100℃,汞也不會揮發損失。
(2)在酸性高錳酸鉀條件下,尿樣在45~50℃保溫2h,可使結合態汞全部解離出來。低于45℃或少于2h,結合態汞解離不完全,使結果偏低。
(3)含糖尿樣,會迅速耗盡高錳酸鉀,須及時補加以維持氧化狀態,或減少尿樣量。
(4)苯、酮類溶劑對253.7nm紫外線有吸收,如進入吸收管道,會干擾測定。
  呼出氣中苯及尿中酚的測定
一、概述
1.苯的接觸機會:苯的生產;苯為化工原料;苯為常用溶劑和稀釋劑;苯為油漆等的原料。
2.毒性、代謝情況和檢驗指標:苯在生產環境中主要以蒸汽存在于空氣中,通過呼吸道進入人體。
呼出氣中苯和尿中酚可作為苯的接觸指標。美國規定苯的生物接觸指數為:班后尿中總酚50mg/L;次日班前混合呼出氣0.08mg/L;終末呼出氣0.10mg/L。
苯在體內的代謝情況
3.理化性質
苯:無色透明具芳香氣味的液體,mp5.5°C,bp80.1 °C,易揮發,易溶于乙醇、乙醚、汽油、丙酮、氯仿、四氯化碳等有機溶劑中,微溶于水。
苯酚:白色、半透明針狀結晶,mp41 °C,bp182 °C,易溶于乙醇、乙醚、氯仿、甘油和二硫化碳,溶于水,不溶于石油醚。
4.樣品收集
呼出氣:班后用塑料袋直接收集呼出氣或用活性炭管在-70 °C(丙酮-干冰浴)收集。
尿樣:聚乙烯瓶收集,冰箱保存可穩定2周。采樣時間為工作或工作日終了時的第一次尿。
5.檢驗方法
測定呼出氣中苯的最好方法是氣相色譜法,該法靈敏度高,操作簡便。
測定尿中酚可選用對硝基苯胺-亞硝酸鈉法、4-氨基安替比林法、氣相色譜法等。
 

上一頁:生物堿類成分的制備ppt 下一頁:冷凍食品微生物PPT

油田春季安全生產教育材料ppt課件:這是油田春季安全生產教育材料ppt課件,包括了防火災爆炸,防倒塌,防高處墜落,防中毒,防觸電,防泄漏污染,防交通事故等內容,歡迎點擊下載。

區角材料投放ppt課件:這是區角材料投放ppt課件,包括了科學益智區,區角投放材料,美工區,角色區,建筑區,走廊設計等內容,歡迎點擊下載。

關于生物材料的檢驗的ppt

下載地址

關于生物材料的檢驗的ppt

優秀PPT

Copyright:2009-2019 pptbz.com Corporation,All Rights Reserved PPT寶藏 版權所有

免責聲明:本網站內容由用戶自行上傳,如權利人發現存在誤傳其他作品情形,請及時與本站聯系

PPT模板下載 粵ICP備13028522號

舉報 一本大道香蕉中文在线视频,一本大道道高清视频在线观看,一本大道高清视频中文字幕